kab mob siab C yog kab mob ntawm lub siab tshwm sim los ntawm tus kab mob Flaviviridae HCV, uas muaj ib lossis ntau dua RNA molecules. Raws li txoj cai, ib qho kev ntsuas ntsuas tau raug coj los tsim kom muaj kab mob siab C hauv tus neeg mob. PCR yog ib qho kev tshuaj ntsuam xyuas kom pom tseeb qhov kev kuaj mob. Feem ntau cov lus xaus yog muab los ntawm kws kho mob thaum tus neeg mob twb muaj thawj cov tsos mob ntawm tus kab mob.
Dab tsi yog kab mob siab C
Kev puas siab puas ntsws los ntawm tus kab mob kis los ntawm cov ntshav lossis kev sib deev yog hu ua kab mob siab C hauv cov tshuaj. Tus kab mob ua rau yog tus kab mob RNA uas muaj cov kab mob tsis yog cellular ntawm tsev neeg Flaviviridae. Tus kab mob tuaj yeem nyob hauv lub cev tau ntev yam tsis tau qhia nws tus kheej. Yog li ntawd, tsuas yog thaum kuaj pom cov kab mob me me uas siv cov ntshav kuaj ntshav siv PCR RNA RNA, kab mob siab C (raws li kev kuaj mob) raug txiav txim siab.
Flavivirus tsis tsim nyob rau hauv cov noob qoob loo uas cais tawm. Nyob rau hauv tus txheej txheem ntawm kev yug me nyuam, tus kab mob tus neeg sawv cev tsim immunologically txawv kev hloov kho. Tej yam no tiv thaiv lub cev tsis pubCov lus teb tiv thaiv tsim nyog, thiab cov kws tshaj lij muaj teeb meem tsim cov tshuaj tiv thaiv zoo.
Tus kab mob kis tau los ntawm niam txiv. Rau kev kis kab mob, nws yuav tsum nkag mus rau hauv cov khoom kom txaus ncaj qha mus rau hauv cov hlab ntsha.
Yuav ua li cas kuaj kab mob siab C
Viral pathologies ntawm lub siab raug kuaj pom siv cov kev kuaj sim. Cov kev tshawb fawb soj ntsuam ntawm kab mob siab C yog ua los ntawm kev kawm txawv teb chaws thiab txaus ntshai antigens los yog cov tshuaj tiv thaiv kab mob (antibodies) hauv tus neeg mob biomaterial, feem ntau hauv cov ntshav.
- Enzymatic immunoassay (ELISA). Cov txheej txheem yog ua raws li kev tshawb pom ntawm lgM cov tshuaj tiv thaiv hauv cov ntshav. Immunoglobulin yog suav tias yog qhov loj tshaj plaws thiab yog pentamer. Nws manifests nws tus kheej nyob rau hauv thawj tiv thaiv cov lus teb ntawm lymphocytes rau ib yam khoom txawv teb chaws tsis paub.
- Radioimmunoassay (RIA) - kev txiav txim siab ntau ntawm lgM immunoglobulin siv lub npe hu ua radioactive isotope ntawm iodine.
- PCR ntawm kab mob siab C - kev txiav txim siab ntawm tus kab mob RNA hauv biomaterial (ntshav). Qhov kev tshuaj ntsuam no ntseeg tau tias kev kuaj mob.
IgG kuaj tsis ntseeg tau. Nws muaj nyob rau hauv cov ntshav cov ntshav tuaj yeem qhia tsis tau tsuas yog muaj tus kab mob flavivirus xwb, tab sis kuj tseem muaj lwm tus kab mob yav dhau los uas muaj cov kab mob tib yam.
Dab tsi txiav txim siab PCR tsom xam
Polymerase saw cov tshuaj tiv thaiv (PCR) yog raws li kev txheeb xyuas ntawm DNA thaj tsam tshwj xeeb rau qee yam kab mob hauv cov qauv ntawm cov khoom siv rau kev tshawb fawb (epithelium, ntshav). Kev tshuaj xyuas ua rau nws muaj peev xwm txheeb xyuas cov kab mob me tshaj plaws (cov kab mob) los ntawm kev kuaj xyuas lawv RNA lossis DNA hauv cov khoom siv lom neeg.
Cov txheej txheem kuaj mob rau kev kuaj pom cov tshuaj tiv thaiv kab mob siab C PCR yog ua tiav hauv 3 theem:
- Xaiv. Cov khoom siv biomaterial tau ua kom huv si los ntawm impurities thiab DNA tau txais nyob rau hauv theem mobile ntawm chromatographic kem.
- Kev nthuav qhia. Kev tsom xam yog nqa tawm hauv cov cuab yeej-thermostat cycler. Nws ua kom sov thiab ua kom txias rau cov raj kuaj nrog qee yam cyclicity. Rau ib txoj kev tshawb fawb, txog li 35 lub voj voog tau ua. Qhov tshwm sim yog tus lej DNA txaus los kuaj xyuas, txheeb xyuas thiab ntsuas cov kab mob.
- Electrophoresis. Cov khoom tawg tau muab tso rau hauv ib lub gel nrog sib txawv saturation ntawm agarose thiab electrophoresis yog ua. Qhov tshwm sim electropherogram yog tshuaj xyuas ntawm lub computer.
Tsis yog siv tus qauv PCR txoj kev tshawb fawb nkaus xwb, tab sis kuj tseem siv qhov Real Time PCR tsom xam. Nov yog lub sijhawm kuaj mob tiag tiag. Cov txheej txheem tso cai rau kev soj ntsuam zoo thiab ntau yam, uas ua rau nws muaj peev xwm txheeb xyuas qhov tsim thiab cov yam ntxwv ntawm tus kab mob, nrog rau kev sau ntawv kho mob txhawm rau tshem tawm qhov ua rau ntawm keeb kwm ntawm pathology. PCR ntawm lub sijhawm tiag tiag kuj tseem siv los txiav txim siab txog kab lis kev cai dawb huv ntawm cov kab mob sib kis (genotyping).
Yuav ua li cas cov tshuaj tiv thaiv kab mob polymerase ua tiav
Kev kuaj mob, txhua tus tib neeg cov kua roj ntsha tuaj yeem siv tau. Biomaterial rau kev kuaj kab mob siab C feem ntau yog ntshav.
Sampling rau kev kuaj mob yog ua nyob rau hauv cov txheej txheemchaw ua haujlwm. Txhawm rau txhawm rau ntshav, siv cov raj uas siv pov tseg nrog cov tshuaj uas inhibits ntshav txhaws. Cov dej num tsom rau kev tiv thaiv kev sib kis ntawm cov kab mob sib kis pab kom tsis txhob nkag mus rau lwm hom kab mob los ntawm sab nraud.
Ntshav rau PCR ntawm kab mob siab C yog noj thaum sawv ntxov ntawm lub plab khoob. Cov qauv raug xa mus rau qhov chaw kuaj tam sim ntawd. Nws raug tso cai khaws cov biomaterial ntawm qhov kub ntawm +4 txog +8 degrees Celsius. Cov thawv ntim tau sau npe thiab muab cov lus qhia. Cov txiaj ntsig kev xeem muaj nyob hauv 48 teev, qee zaum sai dua.
Type of PCR
Qhov ntau ntawm daim ntawv thov ntawm cov tshuaj tiv thaiv kab mob polymerase yog qhov dav heev. Cov kws kho mob txiav txim siab siv PCR kab mob siab B, kab mob kis los ntawm kab noj ntshav, AIDS, tuberculosis. Hauv oncology, siv txoj kev no, cov qog hlwb raug kuaj pom thaum ntxov.
Muaj txog kaum plaub hom kev tshuaj xyuas. Kev siv ib lossis lwm hom yog nyob ntawm qhov ua tau thiab qhov kawg ntawm kev txheeb xyuas. Qee hom PCR yog qhov tseem ceeb uas qhov tshwm sim xav tau hauv 20 feeb.
txhawm rau kuaj kab mob siab C, 3 hom tshuaj tiv thaiv kab mob polymerase tau siv:
- Kev soj ntsuam zoo tuaj yeem yog qhov zoo, qhia tias muaj tus kab mob hauv lub cev, lossis qhov tsis zoo, qhia tias tsis muaj tus kabmob flavivirus.
- Real-time PCR (quantitative analysis) - txiav txim siab ntau RNA ntawm cov kab mob hauv IU/ml.
- Genotyping yog kev tshuaj xyuas uas qhia txog hom (genotype) ntawm tus kab mob.
Yuav kom paub meej thiab txiav txim siab tus kab mob, ua raws litag nrho peb hom kev tshawb fawb yog siv los sau tshuaj kho kom zoo.
Qualitative polymerase chain reaction analysis
Kev tshuaj xyuas yog qhov yuav tsum tau ua rau txhua tus neeg uas muaj ELISA uas tau kuaj pom cov tshuaj tiv thaiv kab mob HCV. Qhov zoo PCR rau tus kab mob siab C yog qhov kev ntsuam xyuas tsis zoo. Txoj kev no tsuas yog tsom rau kev tshawb nrhiav, tsis suav lossis cais lwm yam tshuaj.
txhawm rau kuaj cov tshuaj tiv thaiv kab mob, cov tshuab kuaj tshwj xeeb yog siv nrog qhov kev nkag siab ntawm qhov tsawg kawg nkaus 50 IU / ml. Yog tias kuaj pom cov tshuaj tiv thaiv kab mob, lwm yam kev ntsuas kom meej tau raug sau tseg. Yog tias qhov tshwm sim tsis zoo, yuav tsis muaj kev sim ntxiv.
Qee zaum, qhov tshwm sim tsis zoo yuav yog vim cov neeg ua haujlwm tsis muaj peev xwm los yog cov tshuaj tsis zoo. Rau kev tuav pov hwm, nws yog qhov zoo dua rov ua qhov kev tshuaj ntsuam xyuas lwm qhov.
Quantitative PCR
Tus qauv yog siv los kawm ncaj qha txog tus naj npawb ntawm flavivirus hauv ib lub voj voog cov tshuaj tiv thaiv. Rau kev ntsuas kom raug, DNA tawg tau siv rau kev sib xyaw ua ke lossis cov ntawv sau fluorescently primers. Muaj ib qho kev tshawb nrhiav kev lag luam uas siv SYBL Green dye. Cov xim yog wedged rau hauv ib qho me me hauv DNA thiab tig xiav thaum irradiated nrog laser.
Kev xav tau yog txiav txim siab los ntawm cov cuab yeej-amplifier hauv digital sib npaug. Cov nqi yuav txawv me ntsis ntawm cov chaw sim thiab yog li yuav tsum tau muab piv nrog cov nqi siv.
Quantitative PCRkab mob siab C pab xaiv cov tshuaj zoo tshaj plaws thiab txiav txim siab lub sijhawm kho. Qhov zaus ntawm txoj kev tshawb no nyob ntawm theem ntawm tus kab mob, hom genotype thiab cov kev kho mob uas tau teem tseg.
Kev txiav txim siab Genotype
Tus kab mob siab C muaj qhov hloov pauv caj ces. Ntau qhov kev hloov kho ua rau nws tsis tuaj yeem tsim cov tshuaj tiv thaiv, thiab kev kho mob nyuaj. Tag nrho ntawm 11 genotypes thiab 100 subtypes tau txheeb xyuas thiab sau tseg. Hauv cov teb chaws ntawm yav dhau los USSR, hauv cov neeg muaj kab mob siab C, PCR feem ntau kuaj pom genotypes 1b thiab 3.
Nyob rau hauv lub xub ntiag ntawm ib yam ntawm cov genotypes, cirrhosis los yog daim siab mob cancer yuav frolic. Tias yog vim li cas nws tseem ceeb heev kom kuaj pom tus kab mob hauv lub sijhawm.
Rau qee cov neeg mob, qee yam tshuaj tsim los tiv thaiv HCV yog tshuaj lom. Genotyping tso cai rau koj los txiav txim siab hom protein thiab sau tshuaj zoo.
Nyob rau hauv cov txiaj ntsig ntawm kev ntsuas ntaus ntawv muaj tus lej nrog tsab ntawv Latin me me uas qhia txog genotype ntawm tus kabmob. Yog tias kuaj pom HCV tab sis tsis tau ntaus ntawv, qhov no txhais tau tias tus neeg muaj genotype uas tsis zoo rau qee thaj chaw.
Tshawb nrhiav
Tus kws kho mob hais txog kev txiav txim siab cov txiaj ntsig. Tsuas yog cov ntaub ntawv los ntawm ntau qhov kev tshawb fawb (ua ke nrog anamnesis thiab kuaj) tuaj yeem muab cov duab tiag tiag ntawm keeb kwm kho mob.
- Nyob rau hauv tus neeg noj qab haus huv, ib qho kev sim rau cov tshuaj tiv thaiv zoo hauv biomaterial tsis pom dab tsi. Yog hais tias tus nqi "nrhiav" yog qhia, tus kab mob no paub tseeb, thiab tus neeg mobxav tau kev kuaj mob ntxiv tom qab kho.
- Kev txiav txim siab ntawm tus lej ntawm cov kab mob ua rau nws muaj peev xwm ntsuas cov kab mob hauv lub cev. Feem ntau, tus kab mob siab C ntau PCR tsis kuaj pom tus kab mob. Qhov taw qhia txog li 810^5 yog suav tias yog lub nra hnyav thiab, nrog kev kho kom zoo, lav tau qhov txiaj ntsig zoo. Cov txiaj ntsig siab dua yuav tsum tau kuaj xyuas qhov tob thiab txiav txim siab txog kev kho mob mus sij hawm ntev, kom tau txais txiaj ntsig zoo uas tsis muaj leej twg tuaj yeem vouch.
- Cov txiaj ntsig zoo genotyping qhia tias qhov twg genotype raug lees paub. Qhov tshwm sim tsis zoo qhia tau hais tias tsis muaj tus kab mob flavivirus lossis muaj cov genotype uas tsis zoo rau thaj av no.
qhov kuaj PCR zoo qhia tau dab tsi
Txhua yam kab mob hnyav yuav tsum tau kuaj pom zoo. Tus kab mob siab C PCR tau lees paub qhov kev kuaj mob, tab sis kev kwv yees tsuas yog ua tau tom qab kuaj ntxiv thiab ntsuas ntsuas.
Kev kuaj tus kab mob tsis muab daim duab tiav ntawm cov kab mob. Nws yog ib qho tsim nyog los txheeb xyuas nws hom thiab qhov xwm txheej, los txiav txim seb nws cuam tshuam li cas rau daim siab thiab lwm yam kabmob. Kev kuaj pom ntxov ntawm HCV feem ntau muaj qhov txiaj ntsig zoo.
Negative PCR nrog ELISA zoo
Thaum saib cov tsos mob ntawm daim siab puas tsuaj, muaj qhov tshwm sim ntau uas tus kab mob tau nkag mus rau hauv lub cev. Yog li, koj yuav tsum hu rau tus kws kho mob hepatologist lossis tus kws kho mob tshwj xeeb. Thaum lub sij hawm xam phaj, tus kws tshaj lij yuav sau ib qho anamnesis thiab sau cov kev ntsuam xyuas tsim nyog.
YogCov txiaj ntsig ntawm kev tshawb fawb txog kab mob siab C PCR yog qhov tsis zoo, thiab cov enzyme immunoassay yog qhov zoo, qhov no qhia tias muaj cov tshuaj tiv thaiv kab mob flavivirus hauv cov ntshav. Qhov no feem ntau tshwm sim thaum tus kab mob nkag mus rau hauv lub cev me me, yog li lub cev tiv thaiv kab mob tiv thaiv nws ntawm nws tus kheej. Tab sis cov neeg zoo li no tseem suav tias muaj tus kab mob thiab yuav tsum tau kuaj xyuas txhua 6 lub hlis. Yog tias, nrog rau cov txiaj ntsig zoo li no, ib tus neeg raug tsis lees paub kev kuaj mob dawb, nws yog qhov zoo dua los coj PCR rau tus nqi kho mob, thiab yog tias cov txiaj ntsig tau zoo, hu rau tus kws kho mob tshwj xeeb rau kev kuaj mob thiab kho.
Qhov zoo thiab qhov tsis zoo ntawm txoj kev
Thaum tsim kev kuaj kab mob siab C, PCR muaj ntau yam zoo:
- nrhiav pom tus kab mob ntxov.
- Kev txhais tseeb ntawm tus kab mob.
- Kev kuaj mob zoo.
- qhov yuam kev tsawg kawg nkaus.
- High rhiab heev.
Qhov tsis zoo ntawm txoj kev:
- Tus nqi siab ntawm kev tshuaj xyuas. Qhov kev sim xav tau cov cuab yeej kim, cov tshuaj reagents thiab cov neeg ua haujlwm kho mob uas tsim nyog. Tag nrho ua ke ntxiv mus rau qhov ntau heev.
- nruj me ntsis rau kev thauj mus los ntawm biomaterial.
Kev kho mob ntawm daim siab
PCR tsom xam rau tus kab mob siab C yog suav tias yog qhov tseem ceeb rau kev kuaj mob, tab sis tsis paub meej. Rau txoj kev kho kom zoo, yuav tsum muaj ntau qhov chaw kuaj mob ntxiv thiab kev tshawb fawb txog kev ntsuas. Tom qab tag nrhoKev ntsuas ntsuas tus kws kho mob sau ntawv kho mob:
- Kev noj haus 5 yog sau.
- Cawv tsis suav nrog kiag li.
- Kev txais tos sib koom ntawm Interferon thiab Ribavirin rau 25 hnub.
- Courses of hepaprotectors "Essentiale", "Karsil", "Phosphogliv"
- Hauv qhov tshwj xeeb, siv cov plasmapheresis tsis sib xws.
Cov tshuaj uas kws kho mob tau sau tseg yog siv tsis tu ncua, tsis tas yuav hloov cov koob tshuaj. Lub sijhawm ntawm kev noj cov tshuaj yog txiav txim los ntawm tus kws kho mob tom qab dhau qhov kev ntsuam xyuas. Tom qab kawm tiav chav kho mob, koj yuav tsum mus ntsib kws kho mob txhua rau lub hlis.
PCR-kev kuaj mob tso cai rau txheeb xyuas tus neeg sawv cev ua rau tus kab mob siab C thaum ntxov. Qhov no ua rau muaj txiaj ntsig zoo ntawm kev kho mob thiab tiv thaiv kev hloov pauv ntawm tus kab mob mus rau hauv cov ntaub ntawv txaus ntshai xws li cirrhosis thiab hepatocellular carcinoma.
